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IRMM-354 白色念珠菌 (NCPF 3179)標(biāo)準(zhǔn)品樣品的描述每個(gè)小瓶包含一個(gè)白色念珠菌的材料球(NCPF 3179)。

本CRM分別用于根據(jù)ISO 7218[1]和ISO 13681[2]，在營養(yǎng)瓊脂或OGYE瓊脂上菌落計(jì)數(shù)測定白色念珠菌。這種制劑中的酵母細(xì)胞在室溫下不能存活。因此，在分析過程中，從冰箱中逐個(gè)拿出小瓶。在所有步驟中都要使用無菌耗材，并在無菌條件下工作。

1.每個(gè)材料球使用10個(gè)適當(dāng)條件的介質(zhì)板。對(duì)于OGYE瓊脂，采用了倒鍍技術(shù)（見下文）。使用空培養(yǎng)皿，根據(jù)制造商的說明準(zhǔn)備培養(yǎng)基。

2.通過無菌地去除塞子，打開含有材料球體的小瓶。

3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9 g/L)。孵育30秒，通過上下移液均質(zhì)。

NA（標(biāo)準(zhǔn)電鍍）

4。通過在10個(gè)瓊脂平板上分配10份100μL，確保盡可能地從小瓶中除去液體。

5.使用一個(gè)一次性無菌撒布機(jī)(無玻璃撒布機(jī)）將溶解的材料均勻地?cái)備佋诎灞砻?，避免板的邊緣?/p>

6.在最后一個(gè)板的瓊脂表面上輕輕上下移動(dòng)傳播者的末端5次，以幫助清除傳播者上的任何多余的液體。

7.在室溫下干燥盤子30分鐘，然后再倒置。

8.在37°C±1°C下孵育36小時(shí)至48小時(shí)。

OGYE瓊脂（倒入鍍層）

4。通過在10個(gè)空培養(yǎng)皿上分發(fā)10份100μL，確保盡可能地從小瓶中去除液體。

5.加入或倒入約15 mL的熔融(OGYE)瓊脂，冷卻至45°C，并立即旋轉(zhuǎn)以攪拌均勻。每次在盤子中加入瓊脂后旋轉(zhuǎn)。不要等到瓊脂被添加到所有的盤子里再去了。

6.先在室溫下凝固和干燥，45分鐘，然后翻轉(zhuǎn)。

7.在25°C±1°C下孵育36小時(shí)至48小時(shí)。

存儲(chǔ)

IRMM-354 白色念珠菌 (NCPF 3179)標(biāo)準(zhǔn)品瓶應(yīng)立即使用，也可以存儲(chǔ)在-20°C或-70°C。在-20°C或-70°C下保存長達(dá)18個(gè)月時(shí)，未檢測到該材料的不穩(wěn)定性。然而，如果儲(chǔ)存在-20°C下，應(yīng)避免稍后的溫度轉(zhuǎn)移回-70°C，因?yàn)閷?duì)后續(xù)儲(chǔ)存溫度變化對(duì)酵母細(xì)胞活力和恢復(fù)的影響知之甚少。然而，歐盟委員會(huì)不能對(duì)在客戶的場所儲(chǔ)存材料期間發(fā)生的變化負(fù)責(zé)，特別是對(duì)打開的樣品。